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重慶血清兼容PEI轉染試劑

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注意(yi)事項質(zhi)粒質(zhi)量:請(qing)務必使(shi)(shi)用高質(zhi)量轉(zhuan)染(ran)級無(wu)內質(zhi)粒(推薦(jian)使(shi)(shi)用QIAGEN或者(zhe)MN公(gong)司去內質(zhi)粒提(ti)取(qu)試(shi)(shi)劑盒)。通(tong)過(guo)260nm光吸收測定DNA濃(nong)度(du),260nm/280nm比(bi)(bi)值(zhi)確(que)定DNA純(chun)度(du)(比(bi)(bi)值(zhi)應該在1.8~2.0的范圍(wei)之內)。如有可能,請(qing)通(tong)過(guo)瓊(qiong)脂糖凝膠電泳檢測質(zhi)粒的完(wan)整性。細(xi)(xi)(xi)胞條件:使(shi)(shi)用適當保(bao)存(cun)和經常傳代的健康細(xi)(xi)(xi)胞。確(que)保(bao)培(pei)養(yang)(yang)基沒有被細(xi)(xi)(xi)菌(jun)、或支原體污染(ran)。如果細(xi)(xi)(xi)胞是近期復(fu)蘇的液氮凍存(cun)細(xi)(xi)(xi)胞,請(qing)在轉(zhuan)染(ran)前至少傳代兩次。建議使(shi)(shi)用GIBCO或者(zhe)78bio公(gong)司血(xue)清培(pei)養(yang)(yang)細(xi)(xi)(xi)胞。更多關于PEI轉(zhuan)染(ran)試(shi)(shi)劑相關產品問題,歡迎咨(zi)詢上海曼博(bo)生物!廣東PEI轉(zhuan)染(ran)試(shi)(shi)劑怎么樣用PEI轉(zhuan)染(ran)試(shi)(shi)劑時,一般和DNA的比(bi)(bi)例是多少呢?

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方法:1.細(xi)胞(bao)分盤:通過胰酶消(xiao)化收集細(xi)胞(bao),用適當(dang)的(de)(de)(de)完全培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)以(yi)4×105至8×105細(xi)胞(bao)/cm2的(de)(de)(de)密度(du)平(ping)鋪細(xi)胞(bao)于60mm組(zu)織(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)(min)上(shang)(根據實(shi)驗需要(yao)選(xuan)擇培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)(min),使細(xi)胞(bao)貼(tie)壁后(hou)所占總(zong)面積達(da)到培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)(min)面積的(de)(de)(de)70-90%)。根據細(xi)胞(bao)貼(tie)壁情況于含(han)(han)(han)5%CO2的(de)(de)(de)37℃溫(wen)箱中(zhong)孵育8-24h,當(dang)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁完全后(hou)即可開始(shi)轉(zhuan)染。轉(zhuan)染前換(huan)入2mL預(yu)熱的(de)(de)(de)無血(xue)清培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)。2.制備PEI-DNA混(hun)(hun)合(he)物:以(yi)60mm組(zu)織(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)(min)用420μL反應總(zong)體積為例。準備兩(liang)支1.5mL離心管(guan),一(yi)(yi)管(guan)將(jiang)質粒DNA(總(zong)量(liang)2-8μg為佳)加(jia)入240μLHBS中(zhong),混(hun)(hun)勻。另一(yi)(yi)管(guan)中(zhong)則(ze)用HBS將(jiang)100μM的(de)(de)(de)PEI儲(chu)存液(ye)稀釋成(cheng)10μM,充(chong)分混(hun)(hun)合(he)。然后(hou)取180μL10μMPEI溶(rong)液(ye)加(jia)入含(han)(han)(han)有DNA的(de)(de)(de)HBS中(zhong),充(chong)分混(hun)(hun)勻后(hou)室溫(wen)靜置(zhi)20-30min。將(jiang)這(zhe)420μL的(de)(de)(de)PEI-DNA混(hun)(hun)合(he)液(ye)逐(zhu)滴(di)加(jia)入上(shang)述單層細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong),輕輕搖動平(ping)皿(min)(min)混(hun)(hun)勻,置(zhi)于含(han)(han)(han)5%~7%CO2的(de)(de)(de)37℃溫(wen)箱孵育。注(zhu):每次用100μM的(de)(de)(de)PEI儲(chu)存液(ye)前都(dou)需要(yao)先將(jiang)其充(chong)分混(hun)(hun)勻,保證所取的(de)(de)(de)濃度(du)一(yi)(yi)致(zhi)。3.培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)6-10h后(hou)更換(huan)為37℃預(yu)熱的(de)(de)(de)含(han)(han)(han)有血(xue)清的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji),繼續(xu)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),16h左右(you)可以(yi)觀測到報告基(ji)因(yin)的(de)(de)(de)表達(da)。更多(duo)關(guan)于PEI轉(zhuan)染試(shi)劑(ji)相關(guan)產(chan)品(pin)問題(ti),歡迎咨(zi)詢上(shang)海(hai)曼(man)博生物!

接種細(xi)(xi)胞(bao):轉染(ran)(ran)前(qian),用(yong)(yong)膠原酶(WORTHINGTONG公(gong)司LS004196)消化細(xi)(xi)胞(bao)并(bing)計(ji)數(不(bu)建(jian)議用(yong)(yong)胰酶)。調(diao)整細(xi)(xi)胞(bao)濃度(du)(du),將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)鋪入細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)器皿,每(mei)(mei)個孔置(zhi)(zhi)入的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)量應能使轉染(ran)(ran)時(shi)細(xi)(xi)胞(bao)匯合度(du)(du)達到70~80%。2.準備(bei)DNA-PEI復(fu)合物(wu):DNA、PEI試(shi)(shi)劑(ji)和稀(xi)釋(shi)劑(ji)在進行以下(xia)步(bu)驟(zou)前(qian)需先使其(qi)升至室溫。依據(ju)表1所示,用(yong)(yong)Opti-MEMITM(Invitrogen)或其(qi)他適合的(de)(de)(de)(de)(de)(de)無蛋白培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基稀(xi)釋(shi)適量DNA。用(yong)(yong)同(tong)樣的(de)(de)(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基稀(xi)釋(shi)PEI試(shi)(shi)劑(ji)。每(mei)(mei)1μgDNA需用(yong)(yong)1.5-5μL線性PEI轉染(ran)(ran)試(shi)(shi)劑(ji)(這個需要客戶自行摸索(suo)配比(bi),每(mei)(mei)一批轉染(ran)(ran)試(shi)(shi)劑(ji)和每(mei)(mei)一批DNA比(bi)例可能會稍有(you)不(bu)同(tong))。一邊(bian)輕輕渦旋裝有(you)DNA溶液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)試(shi)(shi)管,一邊(bian)將(jiang)稀(xi)釋(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)線性PEI轉染(ran)(ran)試(shi)(shi)劑(ji)滴加(jia)至試(shi)(shi)管中(注(zhu)意:請(qing)勿(wu)顛(dian)倒添加(jia)順序)。充(chong)分混勻后(hou)(hou),室溫靜置(zhi)(zhi)10~25min以形成DNA-PEI復(fu)合物(wu)。當溶液(ye)體積較大時(shi),請(qing)用(yong)(yong)圓底聚丙烯管,例如(ru)NEST5mL/14mL離心管。3.轉染(ran)(ran)細(xi)(xi)胞(bao):直接向每(mei)(mei)個孔中加(jia)入DNA-PEI復(fu)合物(wu)并(bing)輕輕渦旋培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)板/培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿。在無血清條件下(xia)轉染(ran)(ran)時(shi),去除生長培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基,替(ti)換成無血清培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基,然(ran)后(hou)(hou)滴DNA-PEI復(fu)合物(wu)。轉染(ran)(ran)1.5h后(hou)(hou),添加(jia)?體積的(de)(de)(de)(de)(de)(de)包(bao)含30%血清的(de)(de)(de)(de)(de)(de)生長培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基。更多關于Polysciences PEI轉染(ran)(ran)試(shi)(shi)劑(ji),歡迎咨詢(xun)上海曼博生物(wu)!有(you)誰用(yong)(yong)過40K的(de)(de)(de)(de)(de)(de)PEI轉染(ran)(ran)試(shi)(shi)劑(ji)?

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材料:質(zhi)粒DNA指數(shu)生長的真核細(xi)(xi)胞(bao)PEI(聚(ju)乙(yi)烯(xi)亞胺)1×HBS(pH7.4)配方(fang):PEI儲(chu)存(cun)液(100μM):稱(cheng)取125mgPEI粉末溶解于(yu)50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guo)濾,儲(chu)存(cun)于(yu)4℃備用。1×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于(yu)900ml超(chao)純水(shui),加入(ru)20ml1M的HEPES,調pH值到(dao)7.4,定容(rong)至1L,過(guo)濾(0.2μm濾膜)后(hou)儲(chu)存(cun)于(yu)4℃備用。方(fang)法(fa):1.細(xi)(xi)胞(bao)分盤:通過(guo)胰(yi)酶消化收集細(xi)(xi)胞(bao),用適當的完全培(pei)養基以4×105至8×105細(xi)(xi)胞(bao)/cm2的密度平鋪細(xi)(xi)胞(bao)于(yu)60mm組織(zhi)培(pei)養皿(min)上(根(gen)據實驗需要選擇培(pei)養皿(min),使細(xi)(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)后(hou)所(suo)占(zhan)總面積達到(dao)培(pei)養皿(min)面積的70-90%)。根(gen)據細(xi)(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)情(qing)況于(yu)含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細(xi)(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)完全后(hou)即可開始轉(zhuan)染(ran)。轉(zhuan)染(ran)前換入(ru)2mL預(yu)熱的無血清培(pei)養基。如何辨別假的PEI轉(zhuan)染(ran)試劑。無動物源成分PEI轉(zhuan)染(ran)試劑中國代理權

哪個品牌的PEI轉染試劑性價比高呢?重慶(qing)血清兼容PEI轉染試劑

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廣東創業汽配連鎖加盟多少錢
第1樓
保養 等(deng) 87 人(ren)贊同該(gai)回答(da)

保養(yang)(yang)愛車(che)(che)除了(le)(le)(le)要學會(hui)保養(yang)(yang)知識和技巧之外(wai),還(huan)要學會(hui)購買配(pei)(pei)件,怎(zen)樣弄(nong)汽配(pei)(pei)加盟呢。大部分車(che)(che)主一開始購買配(pei)(pei)件都是在(zai)4S店或(huo)者汽修(xiu)門店,一步到位,方便省心,就是收費比較貴,養(yang)(yang)車(che)(che)時間(jian)長了(le)(le)(le),也漸漸積(ji)累了(le)(le)(le)養(yang)(yang)車(che)(che)知識,就想 。

臺州少兒編程加盟
第2樓
少兒 等 46 人贊同該回答(da)

少兒(er)編(bian)程(cheng):讓孩(hai)子們掌握(wo)未來(lai)的(de)技能隨著科技的(de)不(bu)斷發展,編(bian)程(cheng)已(yi)經(jing)成(cheng)為(wei)了一(yi)(yi)項越(yue)(yue)來(lai)越(yue)(yue)重(zhong)要的(de)技能。在(zai)未來(lai),無論(lun)是在(zai)工作(zuo)還(huan)是生(sheng)活中,都(dou)需要掌握(wo)一(yi)(yi)定的(de)編(bian)程(cheng)知識(shi)。因此,讓孩(hai)子們學習編(bian)程(cheng)已(yi)經(jing)成(cheng)為(wei)了越(yue)(yue)來(lai)越(yue)(yue)多家長的(de)選擇(ze)。少 。

福建專業生產波紋管廠家供應
第3樓
無錫 等 28 人贊同該(gai)回答

無錫偉哲配線器材有(you)限公(gong)司向您介紹金(jin)屬波紋管(guan):金(jin)屬波紋管(guan)是一(yi)種外(wai)型象(xiang)規則的(de)(de)波浪樣的(de)(de)管(guan)材,常用的(de)(de)金(jin)屬波紋管(guan)有(you)碳鋼(gang)的(de)(de),和不銹(xiu)鋼(gang)的(de)(de),也有(you)鋼(gang)質襯塑的(de)(de)、鋁質的(de)(de)等等。主要(yao)(yao)用于需要(yao)(yao)很小的(de)(de)彎曲半(ban)徑非同(tong)心軸向傳動,或者不 。

湛江儲存冷庫品牌
第4樓
常高 等 28 人贊同(tong)該回答

常(chang)高(gao)溫冷(leng)(leng)庫(ku)(ku)制冷(leng)(leng)量(liang)計算公式為:冷(leng)(leng)庫(ku)(ku)容(rong)積(ji)×90×1.16+正偏差,正偏差量(liang)根據(ju)冷(leng)(leng)凍或(huo)冷(leng)(leng)藏物品(pin)的冷(leng)(leng)凝溫度、入庫(ku)(ku)量(liang)、貨物進出庫(ku)(ku)頻率(lv)確定,范(fan)圍在100-400W之間(jian);中溫冷(leng)(leng)庫(ku)(ku)制冷(leng)(leng)量(liang)計算公式為:冷(leng)(leng)庫(ku)(ku)容(rong)積(ji)×95×1 。

陜西裝配式泳池推薦廠家
第5樓
裝配 等 95 人(ren)贊同該(gai)回答

裝配式(shi)泳(yong)池裝配式(shi)泳(yong)池)基本部(bu)件:主(zhu)要由六大系(xi)統(tong)組成,鋼(gang)結構(gou)池體(ti)系(xi)統(tong)圍板結構(gou))、防水膠(jiao)膜系(xi)統(tong)PVC防水膜)、整體(ti)功能系(xi)統(tong)衛浴衣柜等服務設施)、水處理過(guo)濾系(xi)統(tong)、走道平臺及護(hu)欄系(xi)統(tong)、配套附件系(xi)統(tong)照明救生等) 。

水城本地高中教育哪家好
第6樓
高等(deng) 等(deng) 36 人贊(zan)同(tong)該回答

高(gao)等教育的發(fa)展趨勢是(shi),強(qiang)調厚基礎(chu)(chu)、寬口(kou)徑(jing)的大(da)類招生(sheng)、大(da)類培養,強(qiang)調通識教育和基礎(chu)(chu)學(xue)科的教學(xue),為大(da)學(xue)生(sheng)適應(ying)快速發(fa)展的社會變革(ge)準備(bei)深厚的素養。如果高(gao)中教育過分強(qiang)調特(te)色化,培養的學(xue)生(sheng)到大(da)學(xue)則難以適應(ying)大(da)學(xue)的要 。

山西千級凈化工程參數
第7樓
溫州(zhou) 等(deng) 58 人贊同該回答

溫州開泰凈(jing)化(hua)(hua)科技有限公司科技有限公司是(shi)一家以工(gong)程設計,施工(gong),產品銷(xiao)售,貿(mao)易為(wei)一體(ti)的專業凈(jing)化(hua)(hua)公司。其中凈(jing)化(hua)(hua)除塵系列風淋(lin)室、工(gong)作臺、自(zi)凈(jing)器(qi)、高效送風口、傳遞窗、潔凈(jing)層流罩、潔凈(jing)采樣車、生(sheng)物安全(quan)柜(ju)、風淋(lin)屏、 。

現貨德國C+KIndentometer IDM800
第8樓
經皮 等 23 人贊同該回答

經皮(pi)水(shui)分(fen)流(liu)失(shi)和水(shui)分(fen)蒸發熱(re)損(sun)失(shi)測試探頭Tewameter TM Hex新(xin)一代德(de)國CK公司(si)的Tewameter TM Hex探頭不僅可(ke)以(yi)測試經皮(pi)水(shui)分(fen)流(liu)失(shi)TEWL值(zhi),還可(ke)以(yi)測試令(ling)人興奮的新(xin)參數,皮(pi)膚熱(re)擴散損(sun) 。

鹽田區行政事業單位審計服務
第9樓
專(zhuan)項 等 33 人贊同(tong)該回答

專項(xiang)審計(ji)(ji)是(shi)指對特(te)定領域、特(te)定問題或(huo)特(te)定機(ji)構進(jin)行(xing)的(de)一種審計(ji)(ji)形式。其(qi)目的(de)是(shi)為了(le)發現和(he)解決(jue)特(te)定領域、問題或(huo)機(ji)構存在的(de)問題,提高管(guan)理效(xiao)率和(he)經濟效(xiao)益,保障國家(jia)和(he)人(ren)民的(de)利益。具體來說,專項(xiang)審計(ji)(ji)的(de)目的(de)包括以下幾(ji)個(ge)方 。

西安超寫實虛擬人定制服務
第10樓
什么 等 73 人贊同該(gai)回答

什么(me)是數(shu)(shu)字虛擬(ni)(ni)人(ren)?數(shu)(shu)字虛擬(ni)(ni)人(ren)的(de)廣義定義為數(shu)(shu)字化(hua)外形的(de)虛擬(ni)(ni)人(ren)物(wu)(wu),是“虛擬(ni)(ni)”存在于非物(wu)(wu)理(li)世界中(zhong))+“數(shu)(shu)字”由計(ji)算機圖形學、圖形染、動作捕捉、深(shen)度學習、語音合成等計(ji)算機手段(duan)創(chuang)造及使用)+“人(ren)”具有多重人(ren)類特 。

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